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Asunto:[difusioncav] harinas de carne y hueso o alimentos para animales
Fecha:Viernes, 18 de Noviembre, 2005  22:24:14 (-0300)
Autor:Nelson Guizzo <nelson22 @.....com>

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La Encefalopat ía Espongiforme Bovina o Mal de la Vaca Loca
Por Med . Vet. Leonardo Mascitelli
Comisión asesora técnica BSE de la SAGYPA
Fuente: InfoVet Nº 70

A partir de 1996, a la Encefalopatía Espongiforme B ovina se la asoció a una Encefalopatía Espongiforme Trasm isible. A partir de allí, esta enfermedad, más conocida c omo Mal de la Vaca Loca, tomó notoriedad en todo el mundo . Produce un tipo de lesión microscópica en el Sistema Ne rvioso Central, tiene un largo período de incubación, es siempre fatal y está producida por un agente infeccioso n o convencional.

Se denominan Encefalopatías Espongiformes Transmis ibles (EET) a un amplio grupo de enfermedades neurodegene rativas de los animales y del hombre, entre las cuales se encuentra la Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB; en inglés Bovine Spongiform Ence-phalopathy, BSE) o «mal de la vaca loca».
Algunas de estas enfermedades, como l a Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ) en los seres huma nos, fueron descriptas por primera vez hacia el año 1920. Otras, como el Scrapie o Prúrigo Lumbar, que afecta a lo s ovinos y caprinos, son conocidas desde hace más de dosc ientos setenta años. La EEB se reconoce en 1986 en bovino s, en tanto que una variante de la Enfermedad de Creutzfe ldt-Jakob (vECJ) ha sido descripta recientemente, a comie nzos del año 1996, en el humano.
Este tipo de enferm edades están relacionadas clínica y anatomopatológicament e, y reciben la denominación de espongiformes por el tipo de lesión microscópica que se produce en el Sistema Nerv ioso Central (SNC). Tienen ciertas características en com ún, entre otras, un largo período de incubación, un curso progresivo con degeneración del SNC que produce cambios es-pongiformes en estos tejidos, son siempre fatales y es tán producidas por un agente infeccioso no convencional.

Notoriedad
Lo que produjo q ue la EEB tomara notoriedad dentro de este grupo de enfer medades fue el hecho de haberse informado en 1996 su asoc iación a una EET de los humanos, llamada variante de la E nfermedad de Creutzfeldt-Jakob (vECJ). En consecuencia, l a vECJ es una nueva enfermedad de los seres humanos trans mitida por alimentos y la EEB debe ser considerada una zo onosis.
La EEB se detectó por primera vez en el Rein o Unido de Gran Bretaña en 1986, en zonas alejadas entre sí. Se debe recordar que algunos casos que quedaron sin d iagnosticar del año 1985 figuran como sospechosos de EEB. De los casos ocurridos fuera del Reino Unido, incluyendo Irlanda del Norte, el mayor número corresponde a la Repú blica de Irlanda, donde la primera comunicación fue en el año 1989. En Suiza se diagnosticó el primer caso en novi embre de 1990, en enero de 1991 se produjo el primer caso en Francia y en 1992 en Dinamarca. No se logró frenar la diseminación y la enfermedad llegó finalmente a la mayor ía de los países de Europa que habían mantenido intercamb ios de animales vivos y harinas de carne y hueso consider ados de riesgo, entre sí o con el Reino Unido.
La in formación científica y epidemiológica disponible ha demos trado que el ingreso de la enfermedad a un país se produc e a partir de la introducción, vía importaciones o ingres os ilegales, de harinas de carne y hueso o alimentos para animales que las contengan y contaminadas con el agente causal de la Encefalopatía Espongiforme Bovina o de anima les vivos que estén incubando la enfermedad. Luego tambié n se relacionó la difusión con las exportaciones desde el Reino Unido de gelatinas y sebos que pudieran contener p roteínas infectantes.
Fuera del continente europeo, y quince años después de la aparición de los primeros cas os en el Reino Unido, se diagnosticó la enfermedad en Jap ón en 2001, en Israel en 2002 y recientemente, en el año 2003, en Norte América, en mayo en Canadá y en diciembre en Estados Unidos.
La mayoría de los casos reconocid os se habían infectado cuando eran terneros; la edad prom edio de la aparición de la enfermedad es 5 años con un in tervalo que varía entre los 21 meses y los 18 años, y el periodo de incubación promedio es de 60 meses. Los elemen tos actualmente conocidos indican que la enfermedad provi no del uso de alimentos para animales que contenían harin a de carne y huesos contaminada por un agente de EET tipo Scrapie.

Rendering
El vehí culo de la infección fue la harina de carne y hueso que e s uno de los dos subproductos que se obtiene del tratamie nto de los despojos de la matanza y faena de los animales , este proceso es denominado "rendering". Esta harina era comúnmente utilizada como un suplemento protei co en alimentos concentrados, se la había usado en el Rei no Unido y Europa para la alimentación de bovinos durante al menos 50 años. Pero el Reino Unido era el único país con Scrapie endémico, donde cantidades significativas de harina de carne y hueso se emplearon en la alimentación d e bovinos desde los '70.
Esta práctica de suministra r harinas de carne y hueso a los terneros, que aparenteme nte no se aplicaba en Europa continental y EE.UU., puede explicar que la epidemia se haya iniciado y establecido s ólo en el Reino Unido. Australia empleaba la misma prácti ca, pero nunca presentó casos de EEB, lo que se explicarí a porque Australia está libre de Scrapie.
Además, se debe considerar que durante los años 70 y principios de los 80 se cambiaron los procedimientos de fusión y extrac ción por solventes, por el cual los despojos animales se procesaban para producir harinas de carne y hueso. Si bie n ninguno de los procesos de «rendering» empleados antes de los 70 inactivaba completamente a los agentes de las E ET, en este caso el Scrapie, los cambios introducidos per mitieron una supervivencia 10 veces mayor de la infectivi dad en estas harinas.
Dichos cambios en el procesami ento fueron adoptados por la caída del precio del sebo —p arte rica en grasas del proceso cuyo rendimiento aumenta al usar solventes—, el aumento del costo de la energía de bido a la crisis del petróleo y la necesidad utilizar sis temas más seguros en reemplazo de los solventes potencial mente explosivos y carcino-génicos. Hechos tales como la menor utilización de solventes provenientes de los hidroc arburos y el uso de temperaturas inferiores son factores que pueden haber dado lugar a supervivencia del agente in feccioso en títulos mayores que con los anteriores proced imientos.
La evidencia epidemiológica, como ser la a lta relación de población ovina contra la bovina, unida a la alta incidencia de Scrapie en los ovinos, endémico en el Reino Unido, indica que esa fue la probable fuente de transmisión del agente infeccioso que desencadenó la epi demia de EEB. Sin embargo, los experimentos indican que l a EEB viene aparejada con una única cepa principal de age nte infeccioso y que si bien se han identificado más de 2 0 cepas diferentes de Scrapie hasta la fecha, ninguna par ece corresponder a la que se viera en la EEB.

< strong>Desencadenantes
Independientemente del origen del agente causante de la EEB, es probable que el reciclaje del ganado bovino infectado mediante los cambi os en los procesos de fusión y extracción en los años 80 fuera en gran parte responsable de desencadenar la epidem ia, amplia y explosiva. Cabe recalcar que la EEB se ha tr ansmitido experimentalmente por vía oral al ganado bovino con menos de 0,1 gramos de cerebro bovino infectado por la EEB.
Se ha demostrado que los cerdos, no así los pollos, son sensibles a la EEB por inoculación parenteral de homogenado cerebral bovino infectado. Sin embargo, la prueba realizada alimentando cerdos con una dosis oral m uy grande de cerebro infectado por EEB no produjo la enfe rmedad.
No hay ningún tratamiento eficaz ni preventi vo sobre el animal, como podría ser la utilización de una vacuna, y la enfermedad siempre lleva a la muerte del an imal afectado.
El período de incubación es largo, est o significa que desde que el animal se infecta al comer a limento contaminado pueden pasar en promedio alrededor de 5 años hasta que presenta los síntomas clínicos y, recié n en ese momento, puede ser detectado. De allí que los an imales que presentan síntomas clínicos sean adultos, gene ralmente mayores de 5 años, que se infectaron de terneros .
Cabe aclarar que se han reportado casos en animale s más jóvenes, siendo el de menor edad con sintomatología nerviosa un bovino de 21 meses de edad.
Las caracterí sticas propias de este tipo de enfermedades tienen relaci ón directa con el agente causante. Existen diversas teorí as acerca de la naturaleza del agente etiológico. Las hip ótesis o modelos sobre el agente etiológico de las EET de ben ser capaz de explicar la falta de respuesta de anticu erpos, la potencialidad de existencia de "barrera in terespecie" así como la presencia de "cepas&quo t; del agente. Se definen "cepas" diferentes to mando en cuenta los tiempos de incubación, el tipo de les iones histopatológicas en animales de experimentación y e n base a las características bioquímicas de la proteína a sociada.
La característica fundamental de los agente s de las EET es la excepcional resistencia de la infectiv idad a todos los métodos conocidos de inactivación de otr os agentes. El agente de la EEB parece ser el de mayor re sistencia.
Las distintas hipótesis o modelos elabora dos tratan de explicar la posibilidad de multiplicación d e un agente en el que no es posible detectar material gen ético. Los signos clínicos, las características de propag ación y de transmisibilidad de este grupo de enfermedades indican que es causada por un agente transmisible no con vencional denominado "prion", para expresar que se trata de una proteína infecciosa desprovista de ácido nucleico ó material genético.
La teoría priónica po stula que al ingresar a un animal sano, esta proteína inf ectante produce por contacto la transformación de proteín as normales en infectantes, que al acumularse en el Siste ma Nervioso Central interfieren en su funcionamiento.

Proteína priónica
Fue el Dr. S tanley B. Prusiner, de la Universidad de California en lo s EEUU, quien en 1982 informó del hallazgo de una proteín a anormal en el cerebro de hámsters infectados con Scrapi e. Un año más tarde identificó a esta proteína y la llamó PrP o proteína priónica, definiendo a estos priones como «partículas proteínicas infecciosas que resisten los pro cesos que inactivan los ácidos nucleicos». En reconocimie nto al mérito científico de su teoría de los priones, el Dr. S. B. Prusiner recibió el Premio Nobel de Medicina en el año 1997.
Existe una asociación específica entre la forma anormal de la proteína del prion, PrP, y las EE T. La proteína PrP presenta dos formas: una normal, PrPC, que no causa ningún daño, y otra anormal, PrPSc, resiste nte a los procesos normales de degradación. El contacto e ntre ambas induciría un cambio de la proteína normal a la anormal. La hipótesis del prion o de "solamente pro teína" indica que la PrPSc sería el agente infeccios o.
Estudios posteriores han demostrado que la proteí na PrP está presente en animales normales (PrPC), pero en forma diferente a la que se encuentra en tejidos infecta dos (PrPSc). Se ha demostrado además que los ratones que fueron privados de su gen PrP son resistentes a la infecc ión con priones (PrPSc). Prusiner basa sus estudios en qu e estas EET (animales y humanas) son causadas por la acum ulación anormal de una proteína celular modificada. Como resultado del proceso acumulativo se van generando los ca mbios histológicos irreversibles en la masa encefálica, d esarrollándose así la enfermedad.
Las característica s del agente que produce este grupo de enfermedades simil ares a "la vaca loca" hace que no exista una re spuesta inmunológica en el animal infectado que pueda ser detectada por una prueba en sangre u otros tejidos. Por lo tanto, a la fecha, no hay forma de confirmar la enferm edad en el animal vivo. La ausencia de una prueba capaz d e detectar la enfermedad en el individuo vivo ha dificult ado considerablemente la lucha contra este tipo de patolo gías.

Diagnóstico clínico
L a confirmación de la EEB no es posible al momento en el a nimal vivo, sólo puede ser a través del examen postmortem con el análisis histopatológico y bioquímico del cerebro .
La EEB tiene una aparición insidiosa y generalment e es de curso lentamente progresivo. En los bovinos los p rincipales signos clínicos son de índole neurológica, ent re ellos aprensión, miedo, sobresaltos excesivos o depres ión. Se presenta hiperestesia al tacto y al sonido o hipe rreflexia. Existen movimientos anormales tales como fibri lación, temblores mioclonías y ataxia. Los problemas neur ovegetativos que se observan incluyen disminución de la r uminación, bradicardia y alteración del ritmo cardíaco.
Se puede presentar prurito como en el Prúrigo Lumbar, aunque este signo no sea el predominante. Hay pérdida de peso y alteración del estado general.
Las vacas afect adas, por ejemplo, pueden ser renuentes a entrar en la sa la de ordeñe o pueden patear vigorosamente durante el ord eñe. En las vacas secas especialmente, la incoordinación del miembro pelviano y la debilidad pueden ser las primer as características clínicas a ser detectadas. Los signos clínicos se agravan progresivamente terminando con la mue rte del animal.
La EEB, a semejanza de otras EET de los animales y del hombre, se caracteriza por la ausencia de alteraciones anatomopatológicas graves, a la necropsi a, ligadas a la enfermedad. Las lesiones propias son micr oscópicas, están circunscriptas al sistema nervioso centr al y no son inflamatorias.

Diagnóstico diferencial
Son diversas las enfermedades que pueden causar signos neurológicos similares y que se deb en contemplar como diagnósticos clínicos diferenciales. E ntre otras a tener en cuenta: hipomagnesemia, cetosis ner viosa, rabia, listeriosis cerebral y otras encefalitis, p olience-falomalacia o necrosis corticoce-rebral, tumores intracraneales, intoxicación con plomo, etc.

Diagnóstico de laboratorio
El diagnósti co definitivo será dado por el examen post-mortem del tej ido nervioso encefálico, único método disponible actualme nte. Se debe recordar que no es posible utilizar pruebas serológicas debido a la ausencia de respuesta inmunitaria detectable en la EEB u otras EET.
Se debe utilizar preferentemente el encéfalo entero. La extracción para el examen histopatológico se ha de efectuar cuanto antes de spués de la muerte del animal.
En cuanto a las pruebas que se pueden utilizar se destacan las siguientes:
1. Análisis histopatológicos: es la técnica diagnóstica d e elección y es la utilizada para validar otros tests. Se realiza con material obtenido post-morten, fijado en for mol al 10% en solución salina, coloreado y examinado por microscopía óptica en búsqueda de los cambios microscópic os específicos para EEB y otras EET.
Es posible que casos de EEB, tal como acontece en Scrapie, presenten mín imos cambios por microscopía óptica, en consecuencia se h ace necesario implementar pruebas diagnósticas complement arias como la detección de Fibrillas asociadas al Scrapie (SAF), que se realiza en tejido fresco no preservado. Co n esta técnica es posible analizar material con cierto gr ado de descomposición post-mortem.
2. Métodos inmuno lógicos: la base inmunológica utilizada es la reacción an tígeno- anticuerpo entre PrPSc y su anticuerpo específico desarrollado oportunamente. Se han implementado métodos inmunohistoquímicos e inmunoquímicos.
2.1. Inmunohis toquímica: detecta la PrPSc en preparados histológicos. E s el método elegido cuando hay deterioro y no se perciben las estructuras celulares por fallas en el fijado o por autólisis del tejido. Esta técnica también es de uso en o tros tejidos, entre ellos el tercer párpado y las tonsila s en ovejas, posibilitando así los estudios en el animal vivo para Scrapie.
2.2. Inmunoblotting. Permite dete ctar la PrP modificada resistente a la digestión por prot easas purificada por su peso molecular y detectada por un a reacción con anticuerpos anti PrP. En esta técnica se u sa material cerebral no fijado, obtenido en el animal mue rto, que se puede conservar congelado. Los tipos de inmun oblotting usados son el Dot blot y el Western blot.
3. Bioensayos: Se usan métodos biológicos para detectar l a infección por EEB utilizando inoculación en ratones por vía intracerebral o intraperitoneal o por ingestión de m aterial cerebral provenientes de bovinos en estadio termi nal de la enfermedad. La limitante de este método es el l argo período de incubación.
4. Por último se están u tilizando los denominados "pruebas rápidas" par a su uso en gran escala con pronta respuesta que posibili ta su utilización en programas de vigilancia que dependen del contexto epidemiológico del país. Varias de estas pr uebas rápidas se encuentran validadas a nivel internacion al y son de uso en distintos países. Entre las validadas se mencionan:
4.1. Prionics: desarrollado por una co mpañía Suiza, utiliza el Western blot con anticuerpos mon oclonales específicos. Los resultados se obtienen en 24 h oras.
4.2. Enfer: desarrollado en Irlanda, utiliza una ELISA y anticuerpos policlonales. Los resultados se obti enen dentro de las 4 horas.
4.3. CEA: comercializado por Biorad, fue desarrollado por investigadores francese s. Utiliza un método de inmunoensayo sándwich, variante d e ELISA que permite tener resultados en 6 hs.
Las expe riencias realizadas para trabajar en la detección de EEB en el animal vivo tienen distinto grado de desarrollo. < /font>

Casos atípicos
Últimamente, a raíz de diagnósticos realizados en Japón, Italia y Franc ia en el marco de los programas de vigilancia activa, se ha comenzado a hablar de casos atípicos de la enfermedad que están relacionados con distintos perfiles de las elec troforesis observadas en los análisis confirmatorios, com o también las edades de presentación que en algunos casos ha sido en animales más jóvenes de lo habitual.
En este sentido se están llevando a cabo, a partir de grupos de trabajo específicos, estudios de desarrollo que permi tan precisar las características biológicas de estos hall azgos.

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